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免疫组库（immune repertoire, IR）是指在某一时间，机体内功能多样性 T 淋巴细胞和B淋巴细胞的总和。免疫组库测序是以 T/B淋巴细胞受体或者所分泌的特异性抗体的核酸序列为研究目标，用多重PCR技术扩增TCR/BCR多样性的互补决定区(CDR3区)，再结合高通量测序技术进行组库测序。相较于流式细胞仪等传统检测手段，免疫组库检测灵敏度更高、所得数据更全、操作更简便。可广泛用于肿瘤免疫机制研究，寻找自身免疫疾病标志物，微小残留病监测（MRD），抗体研发，用药及疫苗评估等方向，拥有极高应用价值和广阔的市场空间。 产品内容
物种
产品名称
扩增区域
人
AI-TCR-Multi
TCR α链，β链，γ链和δ链
AI-BCR-Multi
BCR重链（H链）和轻链（κ或λ链）
大鼠
AI-IR-Rat-Mult
小鼠
AI-IR-Mouse-Multi
TCR α链，β链，γ链，δ链 BCR 重链（H链）和轻链（κ或λ链）
1. 整体解决方案：依托自主知识产权的MultipSeq多重PCR靶向扩增技术，提供从CDR3的扩增、建库、测序等一系列全方位的服务； 2. 稳定的测序平台：产品适配Novaseq或华大测序平台，测序策略PE150； 3. 全面深度的研究方法：专门针对CDR3的V区及J区两端设计引物，目的扩增CDR3区域； 4. 产品覆盖全面：TCR产品包含α链，β链，γ链和δ链；BCR产品包括重链（H链）和轻链（κ或λ链）； 5. 高保真的扩增技术：采用多重PCR技术，实现不同克隆等效扩增； 6. 多物种产品选择：人、小鼠、大鼠，同时支持多物种免疫组库联合开发。
全血、新鲜/冰冻组织、FFPE、细胞、骨髓、关节液等
1. BCR的3条链/TCR的4条链是一管测序的吗？ 答：目前人的免疫组库产品分为TCR和BCR两个，分别包含4条和3条链，每条链需要单独建库测序。因为在外周血中，95%以上的T细胞表达α和β，γ和δ占比较低，拷贝数有极大的差异，放在1管测序会影响多样性准确性。此外，不同链单独扩增，也可以避免引物之间相互影响。 2. BCR的轻链为什么有2条（κ 和 λ）？这两条链是同时存在的吗？ 答：根据多肽序列的微小差异，抗体的轻链都可分为 kappa (κ) 型或 lambda (λ) 型。哺乳动物的轻链仅有 κ 和 λ 两种类型。一个天然的Ig分子两条轻链总是相同的，但在同一个体内可存在分别带有 κ 或 λ 链的抗体分子。 3. 用DNA还是RNA做免疫组库测序更好？ 答：研究目的不同选择不同的模板，DNA水平侧重于研究基因重组信息，RNA水平侧重于研究基因的表达状态。 DNA容易提取且更稳定，且DNA模板分子的数量能反映T/B细胞的数量；但是，DNA样本必须进行PCR扩增来达到足够的测序量，在多重PCR过程中容易引入PCR bias。 RNA 反转录后的cDNA具有免疫特异性，能最大限度地减少参与PCR反应时所需的模板量，排除不必要的和潜在的会影响PCR反应结果的gDNA，但是RNA样本提取难度较高，稳定性差，数据重复性低，此外，RNA模板也不能真实反映T/B细胞的数量。 4. 交付的生信分析结果包含哪些内容？ 答：分析结果包含VDJ或VJ重排的结果、多样性克隆分布图，以及克隆序列和占比情况。 5. 免疫组库测序的最低投入量是多少，灵敏度有多高？ 答：一条链最低投入量500ng，灵敏度和投入量有关：
6. TCR和BCR各条链有什么区别？ 答：TCR β 链和BCR重链由V、D、J 基因编码的，TCR α链和BCR轻链由V、J基因编码的。目前研究TCR β 链和BCR重链的文章较多。 7. 免疫组库测序推荐的数据量是多少，是否需要高数据量测序？ 答：推荐起始数据量1-2G raw data/链，如果想关注更多低频克隆，可以加大测序数据量。数据量的增加，主要影响低频克隆，并且这些克隆的排序在一千以上，目前文献中往往只关注top100的克隆和疾病的关系。 8. 免疫组库测序范围？ 答：CDR3互补决定区是克隆多样性最多的区域，艾吉泰康免疫组库产品针对TCR/BCR的CDR3区进行建库测序。由于完整的CDR区域过长，最常见的PE150测序策略无法测通，后续数据分析无法进行，如果要测CDR全长，需要使用PE300的测序策略，目前艾吉泰康不提供CDR全长测序的试剂盒。
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